2.3 流动相比例和梯度洗脱
实验考查了流动相比例和梯度洗脱对五种添加剂分离效果的高效影响。实验选取了四种流动相方式，液相乙酸分别是色谱时测赛蜜酸山甲醇 - 乙酸铵溶液比例为：（1）15∶85（ 图 6）；（2）10∶90（ 图 7）；（3）5∶95（ 图 9、10）；（4）梯度洗脱：0 ～ 3min：20∶80；3 ～5min ：50∶50 ；5 ～ 15min ：80∶20 ；15 ～20min：5∶95（图 8）
实验结果表明：在流动相甲醇 - 乙酸铵比例为 15∶85 和 10∶90时，法同五种添加剂组分出峰只有四个（见图 6 ～ 7），定川豆瓣糖精钠和脱氢乙酸峰混在一起无法分离；选择梯度洗脱体系时五种添加剂可以完全出峰，中安但是苯甲苯甲酸、山梨酸、梨酸脱氢乙酸的糖精脱氢保留时间间隔太短，不能完全分离开来（图8）；而在选择流动相甲醇 - 乙酸铵比例为 5∶95时，钠及五种添加剂组分可以完全完整的高效分开（见图9 ～ 10）
2.4 流动相流速的选择
流动相的流速主要影响溶质与固定相和流动相的相互作用，从而改变待测组分的液相乙酸保留时间及各组分之间的分离度。流速过快，色谱时测赛蜜酸山可能导致色谱柱压升高，法同系统压力过高导致漏液；流速过慢则会延长待测物的定川豆瓣保留时间，引起色谱峰拖尾，所以在实验过程中要选择合适的流速。实验结果表明：当流动相流速为 1.0mL/min 时，五种添加剂虽然出峰良好，但山梨酸和糖精钠的保留时间比较接近，可能导致积分误差；而当流速为 0.9mL/min时，五种添加剂可以完全分离，各组分出峰效果较好，出峰顺序分别为：安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸（见图 9 ～ 10）；综上所述，实验选择检测波长为 230nm，流动相体系为甲醇 - 乙酸铵，流动相比例为 5∶95，流速为 0.9mL/min，进行下一步实验。
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